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諾博萊德 RNA 酶抑制劑
RNase Inhibitor
RNase Inhibitor RNA提取配套產品
目錄號：91315
產品內容
產品成份 | 保存 | 91315-2000 |
RNase Inhibitor | -20℃ | 50 μl（40U/μl） |
具體產品的參數以收到產品說明書的參數為準
產品簡介
本制品是經過大腸桿菌表達的重組蛋白，與RNase A形成1：1復合體，對RNase 表現高度的非競爭性抑制（Ki=3×10-10 M）。該反應是可逆的，通過尿素及疏基類試劑能夠解離復合體，使RNase 復活而抑制劑不可逆失活。
本品屬蛋白質性質，與其它競爭性抑制劑（核酸類、無機磷酸類）不同，可以很容易地通過苯fen處理將其從反應體系中除去。
活性定義：
抑制5ng RNase A活性的50%所需要的酶量定義為1個活性單位（U）。
注意事項：
－20 ℃保存，避免起泡，避免劇烈振蕩或攪拌。
使用方法：
第一鏈cDNA合成(以20 μl反應體系為例)
1、加入
Components | Volume |
Total RNA/mRNA | 50 ng-5 μg / 5-500 ng |
Oligo(dT)18(0.5 μg /μl)or Random Primer(0.1 μg/μl) or GSP(Gene Specific Primer) dNTP Mixture (10 mM each) | 1 μl |
1 μl | |
2 pmol 1 μl | |
5× RT Buffer | 4 μl |
RNase Inhibitor(40 units/μl) | 0.5~1 μl |
TUREscript Hˉ RTase | 1 μl |
RNase free H2O to final volume | 20 μl |
2、輕輕混勻
如用 Oligo(dT)18 或基因特異引物(GSP)，42℃孵育 50min。
如用 Random Primer，25℃孵育 10 min，42℃孵育 50 min。
3、85℃加熱 5 min 失活 RTase。
4、PCR / qPCR: cDNA 可直接用于 PCR 反應或儲存于-20°C。
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