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2× Taq plus PCR Master Mix(含染料)
2× Taq plus PCR Master Mix PCR相關
目錄號：71317
產品內容
產品成份 | 71317-05 | 71317-0100 |
2×Taq plus PCR Master Mix | 5x 1ml | 100x 1ml |
保存條件
-20℃保存，有效期 2 年。
經常使用，可置于 4 °C 保存，有效期 3 個月。
具體產品的參數以收到產品說明書的參數為準
產品簡介
本產品包含Taq plus DNA Polymerase、dNTPs和優化的反應緩沖液，濃度為2×。 適合大規模基因檢測，以及高GC含量和復雜模板的擴增。
PCR產物3’端帶A頭，純化后可直接用于TA載體克隆（Cat#V114-20）。
本產品含紅色示蹤染料，不需添加上樣緩沖液即可直接上樣進行電泳；也可經過純化處理，以用于酶切、連接、測序等后續操作。
產品特點
1. 高產：產量是普通 Taq 酶的 2 倍！
2. 高效：延伸速度 5-10s/kb，一般 0.5 小時完成 PCR！
3. 高成功率：對于高 GC 模板和特殊結構的復雜模板有良好效果！
2 × Taq plus PCR Master Mix 使用說明：
一、配制 PCR 反應體系：(于冰上配制)
Component | 20μlReaction | 50 μlReaction | FinalConcentration |
2× Taq plus PCR Mix | 10 μl | 25 μl | 1 × |
Forward Primer (10μM) | 0.4 μl | 1 μl | 0.2 μM |
Reverse Primer (10μM) | 0.4 μl | 1 μl | 0.2 μM |
Template DNA | as required | as required | |
ddH2O | up to 20 μl | up to 50 μl |
參考模板用量（50 μl 反應體系）：
質粒：0.1-10 ng；細菌基因組：10-100 ng；人類基因組：50-150 ng；cDNA：1-5 μl 。
二、建議 PCR 循環條件：
Step | Temperature | Time | Cycle Number |
Initialdenaturation | 94℃ | 3 minutes | |
Denaturation | 94℃ | 10 seconds |
30-35 cycles |
Annealing | 55℃ | 15 seconds | |
Extension | 72℃ | 15 seconds / kb | |
Final Extension | 72℃ | 5 minutes | |
4-8℃ | Hold |
注意事項：
a. 片段≥3kb 或產量較低時，可以采用 20 秒/kb 的延伸速度或采用較多循環數。
b. 對于高 GC 含量或者有二級結構的模板，應該適當延長預變性時間到 5 分鐘，變性
時間可以適當提高 5-10 秒。擴增效果不佳時，還可加入 DMSO 到終濃度 1-8%。
2× Taq plus PCR Master Mix PCR相關
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