血清總鐵結(jié)合力(Total Iron Binding Capacity，TIBC)試劑盒說(shuō)明書(shū)

微量法 100T/96S

正式測(cè)定前務(wù)必取 2-3 個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定

測(cè)定意義：

血清總鐵結(jié)合能力指血清轉(zhuǎn)鐵蛋白可結(jié)合鐵的能力，其含量高低與缺鐵性貧血、急性肝炎等疾病的發(fā)生密切相關(guān)。

測(cè)定原理：

Fe²⁺與菲洛嗪反應(yīng)形成紫紅色化合物，在 562nm 處有特征吸收峰。堿性條件下，血清轉(zhuǎn)鐵蛋白可以與 Fe³⁺結(jié)合，剩余未結(jié)合的 Fe³⁺可以被還原成Fe²⁺，此時(shí)吸光度A1 與未結(jié)合Fe³⁺數(shù)量正相關(guān)；酸化后，轉(zhuǎn)鐵蛋白結(jié)合的Fe³⁺釋放，并且進(jìn)一步被還原成 Fe²⁺ ，此時(shí)吸光度 A2 與總Fe³⁺數(shù)量正相關(guān)。A2 減A1 與TIBC濃度呈正比。

血清總鐵結(jié)合力試劑盒   離子系列

組成：

試劑三：液體 5ml×1 瓶，4℃避光保存。（臨用前根據(jù)用量將A 液和B 液按 1:1 混合）

具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)的參數(shù)為準(zhǔn)

自備儀器和用品：

天平、可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96 孔板、蒸餾水。

測(cè)定操作表：

1、分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀預(yù)熱 30min，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至 562nm。

2、操作表

血清總鐵結(jié)合力計(jì)算公式：

總鐵結(jié)合能力定義：37℃條件下，每升血清結(jié)合 Fe³⁺的μmol 數(shù)。

a. 用微量石英比色皿測(cè)定的計(jì)算公式如下標(biāo)準(zhǔn)曲線：y=0.5478x+0.0281，R²=0.9981

總鐵結(jié)合能力TIBC（μmol/L）=（ΔA-0.0281）÷0.5478×V 反總÷V 樣= 20.99×（ΔA-0.0281）

b. 用 96 孔板測(cè)定的計(jì)算公式如下

標(biāo)準(zhǔn)曲線：y=0.2739x+0.0281，R²=0.9981

總鐵結(jié)合能力TIBC（μmol/L）=（ΔA-0.0281）÷0.2739×V 反總÷V 樣= 41.98×（ΔA-0.0281） V 反總：反應(yīng)總體積，0.46ml；V 樣：反應(yīng)中樣本體積，0.04ml

注意事項(xiàng)：

1. 吸光值大于 0.8，樣品適當(dāng)稀釋再測(cè)定，注意計(jì)算公式里乘以稀釋倍數(shù)。

2. 試劑二、試劑三有一定的毒性，操作時(shí)請(qǐng)做好防護(hù)措施。

3. 檢測(cè)限為 4.78μmol/L。

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